miRNA檢測新技術(shù) 有利于肝癌早期診斷
科技日報(bào)記者3月30日從中國科學(xué)院合肥物質(zhì)科學(xué)研究院了解到,該院安徽光學(xué)精密機(jī)械研究所劉勇研究員、朱靈研究員與中國科技大學(xué)附屬第一醫(yī)院莢衛(wèi)東教授合作,共同研發(fā)了基于數(shù)字等溫?cái)U(kuò)增的miRNA檢測新技術(shù),可用于肝癌miRNA分子標(biāo)志物的快速精準(zhǔn)檢測,有利于肝癌的早期診斷。該研究成果日前發(fā)表于《化學(xué)通訊》上。
我國每年新發(fā)肝癌患者約占全球一半以上,肝癌病死率在惡性腫瘤中位列第二。肝癌起病隱匿,約80%的肝癌患者首診就已進(jìn)入晚期。晚期肝癌5年生存率幾乎為零,而早期肝癌經(jīng)治療,5年生存率可達(dá)60%。血清甲胎蛋白(AFP)是當(dāng)前診斷肝癌的常用指標(biāo),然而約30%的肝癌患者AFP水平正常,易出現(xiàn)假陰性,造成漏診。國家衛(wèi)健委在《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2019版)》中已經(jīng)將循環(huán)游離miRNA作為新的分子標(biāo)記物納入肝癌的早期診斷,其敏感度和特異度分別可達(dá)86.1%和76.8%,大大提高了早期肝癌的診斷率。
miRNA是一類內(nèi)生的、長度約為20—24個(gè)核苷酸的小RNA,需要在專業(yè)實(shí)驗(yàn)室由專門技術(shù)人員進(jìn)行分離純化、探針制備和擴(kuò)增檢測等。目前采用的傳統(tǒng)反轉(zhuǎn)錄熒光定量PCR(qRT-PCR)是一種相對定量的檢測方法,操作過程復(fù)雜、繁瑣。
針對這一問題,研究團(tuán)隊(duì)提出了用于肝癌相關(guān)miRNA快速檢測的數(shù)字等溫?cái)U(kuò)增新技術(shù),設(shè)計(jì)開發(fā)了新型熒光自抑制探針,實(shí)現(xiàn)了miRNA的絕對定量檢測,提高了檢測靈敏度,解決了單樣本多靶標(biāo)檢測難點(diǎn)。團(tuán)隊(duì)相繼突破了微液滴高速制備與分發(fā)、高靈敏度實(shí)時(shí)熒光檢測、高精度圖像識(shí)別分割與統(tǒng)計(jì)算法等關(guān)鍵技術(shù),并聯(lián)合中國科技大學(xué)附屬第一醫(yī)院、中國科學(xué)院合肥腫瘤醫(yī)院開展臨床應(yīng)用研究,建立了基于甲胎蛋白和7個(gè)miRNA的肝癌早期診斷模型。
該項(xiàng)目研發(fā)的“數(shù)字PCR預(yù)混液試劑盒”獲得了一類醫(yī)療器械備案憑證,在病原微生物檢測、腫瘤基因液體活檢、無創(chuàng)產(chǎn)前診斷等領(lǐng)域?qū)⒕哂袕V泛的應(yīng)用前景。科技日報(bào)
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